Kevin Meza Landeros

Delete mapeo.R

1 -# ENFERMEDADES MONOGENICAS
2 -# EQUIPO 5
3 -
4 -# Este script tiene la finalidad de obtener la anotacion en el genoma de Homo sapiens
5 -# de aquellas coordenadas que corresponden a los genes de interes.
6 -
7 -
8 -#se mandan a llamar a todas las librerias a utilizar
9 -library(Biobase)
10 -library(IRanges)
11 -library(rtracklayer)
12 -library(GenomicRanges)
13 -library(Rsamtools)
14 -
15 -
16 -#Obtenemos la anotación de un genoma
17 -Para tener con que comparar el genoma que vamos a analizar, es necesario tener las coordenadas y la cadena en la que se encuentra las regiones del genoma anotadas, para esto ensembl tiene estos archivos.
18 -
19 -#se descarga el genoma de referencia con sus anotaciones, en este caso fueron obtenidos por ensembl100
20 -setwd("/home/aschafer/Documentos/Genomicas/Semestre_4/Genomica_humana/Enfermedades_monogenicas")
21 -homoS = import("Homo_sapiens.GRCh38.100.gff3.gz")
22 -head(homoS)
23 -
24 -#visualización de los datos que tiene el genoma de referencia.
25 -table(mcols(homoS)$type)
26 -
27 -#nos quedamos solo con las columnas que deseamos.
28 -mcols(homoS) = mcols(homoS)[,c("source","type","ID","Name")]
29 -
30 -#Importamos nuestros datos a analizar
31 -Despues de haber trabajado nuestros datos con bowtie, utilizamos el archivo resultante .bam
32 -
33 -#cargamos nuestros datos de las enfermedades monogenicas.
34 -bamFile <- "/home/aschafer/Documentos/Genomicas/Semestre_4/Genomica_humana/Enfermedades_monogenicas/sequences_aligned_sort.bam"
35 -informacion <- c("rname", "strand", "pos", "qwidth")
36 -informacion <- ScanBamParam(what = informacion)
37 -bam <- scanBam(bamFile, param = informacion)
38 -lapply(bam, names)
39 -
40 -#Construimos un GRanges
41 -mapGR <- GRanges(seqnames = bam[[1]]$rname, ranges = IRanges(start = bam[[1]]$pos, width = bam[[1]]$qwidth), strand = bam[[1]]$strand)
42 -head(mapGR)
43 -
44 -
45 -#Contamos mapeos dentro de las anotaciones
46 -#buscamos en que regiones se traslapan
47 -traslapados <- countOverlaps(homoS, mapGR)
48 -typeCounts <- aggregate(traslapados, by = list("type"=mcols(homoS)$type), sum)
49 -head(typeCounts)
50 -
51 -#vamos a graficar todos los resultados obtenidos, pero para eso vamos a juntas todos aquellos que tengan menos de 1000 juntos.
52 -valMin <- 1000
53 -Cuentas <- typeCounts[typeCounts$x > valMin,]
54 -Cuentas <- Cuentas[order(Cuentas$x),]
55 -Cuentas_totales <- rbind(data.frame("type" = "other", "x" = sum(typeCounts$x[typeCounts$x <= valMin])), Cuentas)
56 -porcentaje <- round(100*Cuentas_totales$x/sum(Cuentas_totales$x), 1)
57 -
58 -pie(Cuentas_totales$x, labels = paste(porcentaje, "%", sep = ""), col = rev(rainbow(nrow(Cuentas_totales))), main="Porcentaje de lecturas totales alineadas por tipo", cex=0.9)
59 -legend("topleft", legend = Cuentas_totales$type, cex = 0.8, fill = rev(rainbow(nrow(Cuentas_totales))))
60 -
61 -Debido que vimos que los tipos: cromosoma, región biológica, exon, mRNA, gen, cinco prima UTR. No eran tan significativos, decidimos eliminarlos para los próximos análisis.
62 -
63 -
64 -#graficamos ahora los nuevos datos, pero ahora en lugar de utilizar 1000 como el valor minimo, utilizamos 100.
65 -nuevosDatos <- typeCounts[typeCounts$type != "chromosome" & typeCounts$type != "biological_region" & typeCounts$type != "exon" & typeCounts$type != "mRNA" & typeCounts$type != "gene" & typeCounts$type != "five_prime_UTR",]
66 -colores <- c("violetred1", "dodgerblue4", "green2", "yellow", "red", "steelblue1")
67 -valMin2 <- 100
68 -nuevas_cuentas <- nuevosDatos[nuevosDatos$x > valMin2,]
69 -nuevas_cuentas <- nuevas_cuentas[order(nuevas_cuentas$x),]
70 -nuevas_cuentas_totales <- rbind(data.frame("type"="other", "x" = sum(nuevosDatos$x[nuevosDatos$x <= valMin2])), nuevas_cuentas)
71 -porcentaje2 <- round(100*nuevas_cuentas_totales$x/sum(nuevas_cuentas_totales$x), 1)
72 -pie(nuevas_cuentas_totales$x, labels = paste(porcentaje2, "%", sep = ""), cex = 1, main = "Porcentaje de lecturas alineadas por tipo seleccionados", col = colores)
73 -legend("topleft", legend = nuevas_cuentas_totales$type, cex = 0.9, fill = colores)
74 -
75 -
76 -
77 -
78 -
79 -
80 -
81 -
82 -
83 -
84 -
85 -
86 -
87 -
88 -
89 -
90 -
91 -
92 -
93 -
94 -
95 -
96 -
97 -